产品货号:
HR8361
中文名称:
高尔基体G02红色荧光染色试剂盒
英文名称:
产品规格:
30T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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G02高尔基体染色试剂盒是利用我公司G系列探针进行细胞高尔基体特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的G02高尔基体染色探针为红色荧光标记的高尔基体探针,具有588/616nm的最大激发/发射波长。
以96孔板每孔200μL染色液计,本试剂盒小包装可以染色50个样本。
检测方法:
● 荧光显微镜● 激光共聚焦
样本类型:
● 悬浮细胞● 贴壁细胞
试剂盒以外自备试剂耗材和仪器:
● 荧光显微镜/激光共聚焦● 离心机● 移液器● PBS ● HBSS(不含酚红)
产品组成 | 50T | 100T |
高尔基体G02染料 | 50μL | 50μL×2 |
-20℃避光保存。有效期6个月。
注:
● 染料短期2周内可以2~8℃保存。长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
● 染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
● 可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
● 有效期为试剂盒未拆封前按照要求条件保存的有效期。开封后请尽快用完!
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
● 染色后立即进行分析。
● 本染色液可用于细胞涂片、细胞的检测。
● 标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定最佳条件。以下方法仅供参考。
G02染料-BSA复合物工作液的配制:
1、将50μL高尔基体G02染料母液离心至螺旋盖管底部,然后开盖。
2、将50μL高尔基体G02染料母液置于真空环境1小时左右,待染料溶剂基本挥发完全。
注:
● 如果有条件,将螺旋盖管开盖首先置于氮气流中,再抽真空。
3、用200μL无水乙醇重溶染料。
注:
● 注意充分混匀。
● 用移液器吸取无水乙醇多次洗涤管壁各部位。
4、准确称取3.4mg BSA,吸取10mL HBSS缓冲液,充分溶解。
【注】
● BSA终浓度为0.34mg/mL。
5、将200μL乙醇G02染料溶液加入10mL HBSS-BSA缓冲液,充分混匀,即为染色工作液。
注:
● 用不完的复合物染色工作液可以置于-20℃避光保存。
活细胞高尔基体染色
1、用合适的缓冲液如HBSS冲洗盖玻片上的细胞。
注:
● 也可以在其他细胞培养器皿原位染色,染色液以充分覆盖细胞为准。
2、加适量染色工作液覆盖细胞,4℃避光孵育30分钟。
3、用预冷的新鲜培养基多次冲洗样品细胞。
4、加新鲜培养基,置37℃避光孵育30分钟。
5、新鲜培养基洗涤样品,用荧光显微镜观察。
固定细胞高尔基体染色
注:
● 不能使用含甲醇和丙酮的固定剂。
1、用HBSS冲洗盖玻片上的细胞,用0.5%戊二醛/10%蔗糖/100mM PIPES pH7.0或者2~4%多聚甲醛/PBS室温固定5~10分钟。
2、用预冷的HBSS或培养基多次冲洗固定样品细胞。
3、加适量染色工作液覆盖细胞,4℃避光孵育30分钟。
4、用新鲜培养基多次冲洗样品细胞。
5、用含10% FBS或者2mg/mL BSA的HBSS缓冲液在室温下孵育30~90分钟,以提高高尔基体染色。
6、新鲜培养基洗涤样品,用荧光显微镜观察。
用荧光显微镜检测
最大激发波长为588nm,最大发射波长为616nm。
注:
● 高尔基体强染色,其他细胞内膜结构会有较弱的染色。
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